圣诞专题 | 人工合成着色剂的检测

圣诞夜 · 甜蜜时
Merry Christmas

又是一年圣诞季，商场门口的圣诞树，精心包装的平安果，氛围感安排起来啦。说到圣诞节的氛围感，自然就少不了各式各样的姜糖饼干和永远经典的拐杖糖，那高颜值姜糖饼干的秘诀是什么？

自然是食用色素调和后的糖霜！

用裱花袋把混色后的糖霜装起来，在饼干上慢慢挤糖霜，勾勒出自己喜欢的图案，等糖霜晾干后，美貌与美味兼备的圣诞姜糖饼就做好啦。在使用食用色素的时候要警惕，食品中合成着色剂可随着食物被摄入人体内，如果摄入过多的人工合成色素，会加重肝脏及胃肠道的代谢负担，出现不同程度的食欲不振、腹痛腹泻等症状。

因此，要注意食用色素的使用量，千万不能为了颜值，放弃健康呀~本方法适用于食品中人工合成着色剂的检测。

STEP1 实验材料

（1）Shimadzu LC-40D高效液相色谱仪；

（2）液相色谱柱：ShimNex CS C18（5 μm, 4.6×250 mm; 货号: 380-01230-01）；

（3）11种合成着色剂标准品（货号：380-03615，3组）

（4）SHIMSEN Styra PGM 前处理小柱，150 mg / 6 mL（货号：380-00852-02）；

（5）SHIMSEN Arc Disc HPTFE 针式过滤器（货号：380-00341-05）；

（6）LC/MS认证样品瓶 LabTotal Vial（货号：227-34001-01）；

（7）SHIMSEN Pipet移液枪：

SHIMSEN Pipet PMII-10（货号：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（货号：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（货号：380-00751-06）。

STEP2 样品提取

1、脂肪含量较少的食品

（1）取2.0 g样品于50 mL试管中，加入2 mL水，涡旋混匀；加入25 mL乙醇氨水溶液*，涡旋混匀1 min；于50 ℃水浴超声20 min；于8000 rpm离心5 min，收集上清液于50mL容量瓶中；

（2）向下层残留物中加入15 mL乙醇氨水溶液，按照步骤（1）重复提取一次，合并上清液，用乙醇氨水溶液定容至50 mL；

（3）取10 mL提取液，于50 ℃水浴中氮吹浓缩至1 mL，加入5 mL 5%甲醇水溶液，涡旋混匀，再加入5 mL 5%甲醇水溶液，涡旋混匀，待净化。

2、脂肪含量较多的食品

（1）取2.0 g样品于50 mL试管中，加入20 mL石油醚，涡旋混匀1 min，振荡10 min；于8000 rpm离心5 min，弃去上清液，除尽石油醚溶剂；加入25 mL乙醇氨水溶液，涡旋混匀1 min，于50℃水浴超声20 min；于8000 rpm离心5 min，收集上清液于50mL容量瓶中；

（2）向下层残留物中加入15 mL乙醇氨水溶液，按照步骤(1)重复提取一次，合并上清液，用乙醇氨水溶液定容至50 mL；

（3）取10 mL提取液，于50 ℃水浴中氮吹浓缩至1 mL，加入5 mL 5%甲醇水溶液，涡旋混匀，再加入5 mL 5%甲醇水溶液，涡旋混匀，待净化乙醇氨水溶液。

*乙醇氨水溶液：取700 mL无水乙醇，加入4 mL氨水，用水定容至1000 mL。

STEP3 样品净化

SHIMSEN Styra PGM 固相萃取小柱（货号：380-00852-02）

（1）活化：依次用6 mL甲醇、6 mL水，弃去流出液；

（2）上样：向柱中加入待净化液，弃去流出液；

（3）淋洗：依次加入6 mL 2%甲酸水、6 mL甲醇，弃去流出液；

（4）洗脱：加入6 mL 2%氨水甲醇洗脱，收集洗脱液，注意控制柱流速低于1 mL/min；

（5）定容：洗脱液于50 ℃下氮吹浓缩至500 uL，用流动相定容至2 mL，涡旋混匀，经过滤后上机分析。
 

STEP4 分析方法

1、色谱条件

色谱柱：ShimNex CS C18，250 mm×4.6 mm，5μm（货号：380-01230-01）

流  速：1.2 mL/min   

进样量：10 μL  

柱  温：40 ℃

检测波长：415/520/610 nm

流动相：A：20 mM乙酸铵   B：甲醇

梯度设置：

2、实验结果

人工合成着色剂标准品的液相色谱图（0.01 mg/mL）

（1）柠檬黄；（2）新红；（3）苋菜红；（4）靛蓝；（5）胭脂红；（6）喹啉黄1；（7）日落黄；（8）喹啉黄2；（9）诱惑红；（10）亮蓝1；（11）亮蓝2；（12）酸性红；（13）喹啉黄3；（14）喹啉黄4；（15）赤藓红