摘要
本文建立了21 种氨基酸非衍生法的 LC-MS/MS 测定方法。21 种常见的氨基酸不进行衍生，直接采用 Shim-pack GIST Amide 色谱柱进行分离，岛津串联质谱 LCMS-8050 检测分析，21 种氨基酸保留强，峰型对称，且亮氨酸和异亮氨酸完全基线分离。该方法为 21 种氨基酸非衍生法测定提供参考。
1.实验部分
1.1 实验仪器及耗材
Shimadzu LC-30AD与LCMS-8050 联用系统；
色谱柱:Shim-pack GIST Amide（3 μm，2.1×100 mm；P/N:227-30818-04）；
SHIMSEN Disc HPPTFE 针式过滤器（P/N:380-00341）；
LC-MS 认证样品瓶 LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；
Nichipet Air 移液枪：
Nichipet Air 0.5-10 μL（P/N:00-NAR-10）；
Nichipet Air 10-100 μL（P/N:00-NAR-100） ；
Nichipet Air 100-1000 μL（P/N:00-NAR-1000） ；
Nichipet Air 1000-10000 μL（P/N:00-NAR-10000） 。
1.2 混合对照品溶液的制备
分别称取 21 种氨基酸标准品适量，加水溶解并稀释至 1 mg/mL，制成各标准品母液；分别移取各标准品母液适量，加 50%乙腈水稀释至 50 ng/mL，混匀，备用。
1.3 分析条件
UHPLC 条件：
色谱柱：Shim-pack GIST Amide（3μm，2.1×100 mm；P/N：227-30818-04）
流速：0.5 mL/min；
进样量：1 μL
柱温：40 ℃
流动相：A：0.05 %甲酸水溶液
B：乙腈
梯度洗脱程序如下：
质谱条件：
离子化模式：ESI，正离子扫描；
扫描模式：多反应监测（MRM）
碰撞气：氩气
加热气：干燥空气 10 L/min
雾化气：氮气 3 L/min
干燥气：氮气 10 L/min
接口温度：300℃ DL
温度：150 ℃
加热模块温度：400 ℃
MRM 参数见下表
2.实验结果及讨论
21 种氨基酸+γ-氨基丁酸混标溶液 MRM 谱图（浓度：50 ng/mL）
3.结论
本文建立了21 种氨基酸非衍生法的LC-MS/MS 测定方法。21 种常见的氨基酸不进行衍生，直接采用Shim-pack GIST Amide 色谱柱进行分离，岛津串联质谱LCMS-8050 检测分析，21 种氨基酸保留强，峰型对称，且亮氨酸和异亮氨酸完全基线分离。该方法为 21 种氨基酸非衍生法测定提供参考。