USP<1469>亚硝胺杂质通则确定应在药品中检测的六种亚硝胺包括:N-亚硝基二甲胺(NDMA)、N-亚硝基二乙胺(NDEA)、N-亚硝基二异丙胺(NDIPA)、N-亚硝基乙基异丙胺(NEIPA)、N-亚硝基二丁胺(NDBA)和N-亚硝基甲基氨基丁酸(NMBA)，并且提出了四种分析方法，包括:LC-HRMS、 HS+GC-MS/MS、 LC-MS/MS和GC-MS/MS方法，生产商可以使用这些方法来检测产品中是否存在亚硝胺杂质。

专为客户解决分析领域各种疑难杂症的艾思吉老师，看到USP<1469>通则发布，主动请缨做第一个“吃螃蟹”的人，重现通则，希望通过实际实验提前将可能遇到的问题排查。不出所料，难点重重，好在都被机智的艾思吉老师逐一攻克了。欣喜之余，艾思吉老师也想把新鲜出炉的解决方案和各位粉丝共同分享。

难点1：NDMA假阳性一柱搞定

由于NDMA和DMF的同位素的M/Z相近，且MS2扫描图有m/z接近的碎片，在三重四极杆质谱上难以区分，而常规色谱柱又难以分离NDMA和DMF，所以常规解决方案是选用分辨率更高的仪器进行鉴定，比如Q-TOF。

然而，如果能用一支色谱柱去解决DMF干扰造成的NDMA假阳性的问题，降本又高效，何乐而不为呢？

艾思吉老师收集了实验室里各种宝贝色谱柱，并逐一测试，锲而不舍，最终筛选出了一支“神柱”-基毒专用柱（ShimNex S-GTIs，3 μm，4.6×150 mm；P/N：380-01247-31），终于把“形影不离”的NDMA和DMF“拆散”了！

难点2：同分异构体的分离，还是那支“神柱”

对于NMBA及NEIPA的顺反异构体可以将峰面积分别合并计算，但对于NDPA和NDIPA、NDBA和NDIBA这两组同分异构体，若同时检测需要分开计算。常规的色谱柱很难实现异构体的分离，而质谱端M/Z相同，无法区分。

艾思吉老师又把这支“神柱”（ShimNex S-GTIs，3 μm，4.6×150 mm；P/N：380-01247-31）应用到了两组异构体的分离，果然是“神柱”，真的分开了！

难点3：NDMA灵敏度不够，有诀窍

难点4：离子通道干扰，有神器

NDBA、NDIBA、NEPhA等离子通道容易有干扰，影响杂质的准确定量，可以通过安装鬼峰捕集小柱Ghost Trap（PN：228-59921-92）排除干扰。

空针-连Gost trap DS 7.6*30mm（PN：228-59921-92）

空针-不连接Gost trap

空针-连Gost trap DS 7.6*30mm（PN：228-59921-92）

难点5：更多亚硝胺杂质的筛查，塞查包

虽然USP规定了6种亚硝胺杂质，但艾思吉老师希望通过建立一个筛查方法，实现更多种亚硝胺杂质的监测，最终建立了包括但不限于USP以及EP规定的共计13种亚硝胺杂质的筛查方案。

*黄色标记为USP规定的6种亚硝胺杂质