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使用离子交换柱时的注意事项?
由于离子交换柱的流动相不含有机溶剂,易滋生微生物。为防止由细菌造成的色谱柱污染,流动相建议现用现配,每次配制时要使用洁净、干燥的流动相瓶。请务必使用超纯水
配制,所有组分应使用分析级及以上的试剂、溶剂和盐。配制好的流动相请务必采用0.22μm滤膜过滤,流动相进入系统之前请进行脱气处理,例如超声脱气5 分钟。更换流动相时需要平衡30 倍柱体积以上。
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离子交换剂的基本性质?
1. 离子交换剂应具备高度的不溶性,保证在各种溶剂中不会发生溶解;
2. 具备稳定的理化性质,不能因物理化学变化而发生分解;
3. 具有较大的表面积或疏松的孔状结构,确保交换离子自由地发生扩散和交换。
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液相色谱柱中,表面有孔与无孔的填料,分别具有怎样的优势?
液相色谱柱填料的无孔颗粒结构,可以使样品的横向扩散达到更小,并阻止样品向填料颗粒内部的扩散,因此可以提供更快的分析速度和更高的分辨率。而有孔的填料颗粒,则可以提供更高的样品负载量。
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离子交换色谱柱的常见固定相选择有哪些?
离子交换色谱的固定相有阳离子交换剂和阴离子交换剂两种。阳离子交换剂带有负电荷,用于阳离子的分离;阴离子交换剂带有正电荷,用于阴离子分离。阳离子交换剂最常用的官能团有磺酸盐型,阴离子交换剂最常用的官能团是季胺型。
除强离子交换剂外,还有弱离子交换剂,它们的交换官能团具有弱酸性或弱碱性。羧酸(一C00H)交换剂是一种弱阳离子交换剂,只能在pH足够高到使羧酸解离时才能起交换作用。叔胺(一NR3)基交换剂是弱阴离子交换剂,只有在酸性介质中才有交换作用。
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离子交换色谱柱的应用范围?
离子交换色谱主要是用来分离离子或可离解的化合物。它不仅广泛地应用于无机离子的分离,而且广泛地应用于有机和生物物质,如氨基酸、核酸、蛋白质等的分离,在生物化学领域得到了广泛的应用。
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离子交换色谱柱的分离原理?
离子交换色谱柱以离子交换树脂或化学键合离子交换剂为固定相,利用被分离组分离子交换能力的差别或选择性系数的差别而实现分离的色谱方法称为离子交换色谱法。按照可交换离子所带电荷符号的不同又可分为阳离子交换色谱法和阴离子交换色谱法。